关键词：花生;果针;子房;离体培养
Study on Peg Culture in Vitro of Peanut
Li Changsheng， Xia Han， Zhao Chuanzhi， Hou Lei， Zhang Ye， Zhao Shuzhen*
（Biotechnology Research Center， Shandong Academy of Agricultural Sciences/Shandong
Provincial Key Laboratory of Crop Genetic Improvement， Ecology and Physiology， Jinan 250100， China）
Key words Peanut; Peg; Culture in vitro
花生与大豆、油菜、拟南芥有很大不同，花生植株在地上部分开花，授粉后合子只分裂几次便停止，子房在受精后的一段时间内并未明显膨大，子房柄却不断伸长。伸长的子房柄和未膨大的受精子房形成一针状结构，称为“果针”。在正常生长的花生植株上，随着果针的伸长，受精子房被推入土壤中，在黑暗条件下开始膨大，最终发育成荚果[3～6]。如果人为阻止果针入土，在光照条件下果针将不能膨大形成荚果[4，7，8]。黑暗和机械刺激曾被认为是果针入土后导致荚果膨大的主要原因[9]，但其诱导荚果发育的分子机理尚不清楚。在模式植物拟南芥中的研究表明，激素信号是外界环境调控植物生长发育的桥梁。由于在大田栽培条件下对果针处理受环境影响较大，为获得均一的试验材料以研究黑暗和机械刺激诱导基因表达变化、激素合成和信号传导等的变化，建立和优化果针离体培养体系尤为重要，其优势在于不受季节限制，能够精确控制处理强度、时间等各种因素，可为花生荚果膨大机理的研究提供稳定可靠的试验材料。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验品种 供试花生品种为中华8号，由中国农业科学院油料作物研究所提供。
① GA浓度对子房膨大的影响
A： 基本培养基+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.1 mg/L GA
B： 基本培养基+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L GA
C： 基本培养基+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L GA
② 6-BA浓度对子房膨大的影响
E： 基本培养基+0.5 mg/L GA+1.0 mg/L NAA+0.01 mg/L 6-BA
B： 基本培养基+0.5 mg/L GA+1.0 mg/L NAA+0.05 mg/L 6-BA
F： 基本培养基+0.5 mg/L GA+1.0 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA
③ IAA浓度对子房膨大的影响
G： 基本培养基+0.5 mg/L GA+0.05 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA H： 基本培养基+0.5 mg/L GA+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA
I： 基本培养基+0.5 mg/L GA+0.05 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IAA
④NAA浓度对子房膨大的影响
使用培养基B和H的试验结果，进行比较。
子房膨大率（%）=每瓶培养基中膨大的果针数/接种果针总数×100
2 结果与分析
2.1 GA浓度对子房膨大的影响
由图1可以看出，在6-BA （0.05 mg/L）和NAA（1.0 mg/L ）浓度不变的条件下，花生子房膨大率随GA浓度的升高先增大后减小，当GA浓度为1.0 mg/L时，子房膨大率达最大，为51.1%。表明适宜浓度的GA可以促进子房的膨大，但GA浓度过高则会抑制子房的膨大。
注：A：0.1 mg/L GA;B：0.5 mg/L GA;
图1 赤霉素GA对子房膨大的影响
2.2 6-BA浓度对子房膨大的影响
注：E：0.01 mg/L 6-BA;B：0.05 mg/L 6-BA;F：0.1 mg/L 6-BA。
图2 6-BA对子房膨大的影响
2.3 IAA和NAA浓度对子房膨大的影响
由图3可知，当NAA与IAA浓度均为1.0
图3 IAA和NAA浓度对子房膨大的影响
mg/L时，NAA处理的花生子房膨大率高于IAA。由于IAA是植物体内存在的激素，适当降低IAA浓度至0.5 mg/L，效果优于1.0 mg/L的NAA，子房膨大率可达53.3%。
3 结论与讨论
参 考 文 献：
[2] Pandey M K，Monyo E，Ozias-Akins P，et al. Advances in Arachis genomics for peanut improvement[J]. Biotechnol. Adv.，2012，30（3）：639-651.
[3] Zharare G E，Blamey F P，Asher C J. Initiation and morphogenesis of groundnut （Arachis hypogaea L.） pods in solution culture[J]. Ann. Bot.，1998，81：391-396.
[6] Zhu W，Chen X，Li H，et al. Comparative transcriptome analysis of aerial and subterranean pods development provides insights into seed abortion in peanut [J]. Plant Mol. Biol.，2014，85（4-5）：395-409.
[7] Zamski E，Ziv M. Pod formation and its geotropic orientation in peanut， Arachis hypogaea L.，in relation to light and mechanical stimulus[J]. Ann. Bot.，1975，40：631-636.
[8] Thompson L K，Ziv M，Deitzer G F. Photocontrol of peanut （Arachis hypogaea L.） embryo and ovule development in vitro [J]. Plant Physiol.，1985，78：370-373.
[9] 潘瑞炽，陈惜吟，罗蕴秀.花生入地结荚原因的研究[J].植物生理学报，1983，9：109-116.
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